PCR-RFLP
نوقشت اطروحة الدكتوراه في كليه الطب البيطري بجامعه القادسية للطالبة ( امال كامل عبد الساده ) وبإشراف (الاستاذ الدكتور منير عبد الامير عبد الفتلاوي)
تهدف الاطروحة الى :
1. تحديد بعض جينات المقاومة الجينية المرتبطة بالحيوانات الأليفة والبشر على المستوى الجزيئي.
2. الشجرة التطورية وتسلسل بعض جينات المقاومة الجينية لدى البشر والدجاج.
3- تحليل وتسلسل جينومات عزلات Giardia duodenalis من الأفراد والدجاج .
بينت الاطروحه : التعرف على داء الجيارديا. في محافظة بغداد لتحديد الانواع المرضية للإنسان والدجاج أولاً بواسطة محلول اليود اللوغاريتمي ومن ثم بالطرق الجزيئية التي تعتمد على تسلسل PCR وتحليل شجرة النشوء والتطور تم جمع 140 عينة من الإنسان و 60 عينة من الدجاج خلال الفترة من تشرين الأول 2023 حتى نهاية أبريل 2022.تم فحص ما مجموعه 140 حالة مشتبهة بالبكتيريا المعوية في الإنسان مجهرياً، وأظهرت النتائج أن 27.19.2% من العينات كانت مصابة بداء الجيارديات البشرية. بينما أصيبت 13 (21.6%) من العينات بالطفيل في الدجاج الذي تمت دراسته حسب الأشهر. أظهر انتشار داء الجيارديا البشري معدل إصابة يبلغ 27، 19.2٪ حسب الأشهر، وهو أعلى معدل انتشار بشري في أبريل.
سجلت النتائج (30%) بينما سجل شهر ديسمبر نتائج (5.6%)، لذلك كانت هناك فروق ذات دلالة إحصائية عالية. بينما أظهرت الدجاج نسبة إصابة بلغت 13 (21.6%)، وأظهرت النتائج انتشار مرض الجيارديا. وفقا لارتفاع معدل الإصابة في يناير 28.6٪ ولكن بمعدل أقل في أكتوبر (12.5٪). معدل انتشار الإصابة في كل شهر من فروقات البحث ذات دلالة إحصائية
تم استخدام التمهيدي gdh الخاص بالأنواع للكشف عن G. المعوية من الجيارديات البشرية. ، 27، (19.2٪) تم تشخيصها على أنها G. المعوية في الإنسان عند تضخيم جين الوحدة الفرعية الصغيرة gdh بواسطة تقنية تسلسل PCR عند 778 نقطة أساس
استنتجت الاطروحه:.
1. كان معدل الإصابة بطفيلي الجيارديا المعوية مرتفعاً عند الإنسان والدجاج في محافظة بغداد.
2. بناءً على النتائج، تم تحديد الجيارديا المعوية التي تصيب الإنسان حسب الفحص المجهري والتشخيص الجزيئي في محافظة بغداد.
3. تم الإبلاغ عن وجود فرق كبير (P<0.05) بين مجموعات الأشهر في الفحص المجهري، والذي أظهر زيادة في معدل الإصابة عند الإنسان في شهر أبريل.
4. أظهر شهر فبراير نتائج سلبية، في حين أظهرت الأشهر من يناير إلى مارس معدل إصابة أعلى.
5. أظهر تسلسل جين gdh تسجيل تسع طفرات، ثلاث طفرات منها كانت طفرة نقطية تغيرات انتقالية وكان sevin طفرة صامتة تغيرات انتقالية وتسببت التغيرات في تسلسل النوكليوتيدات لجين gdh في أربع طفرات تغير تسلسل الأحماض الأمينية وطفرة صامتة واحدة.
اوصت الاطروحه :
1. هناك حاجة لمزيد من الدراسات للكشف عن الجيارديا المعوية في الإنسان والدجاج في العديد من المحافظات الحدودية، بما في ذلك على وجه الخصوص مع الدول المجاورة.
2. التقييم المقارن لتحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل باستخدام المجهر للكشف عن حالة الحامل غير العرضي للجيارديا المعوية في قطيع من الحيوانات المهجنة.
3. دراسة تعدد أشكال تسلسل جين gdh في الجيارديا المعوية
4. تعزز نتائج الدراسة الحالية مفهوم أن جنس الجيارديا المعوية يتميز بتنوع كبير في العوائل الدواجن وخصوصية منخفضة لأنواع الدواجن. وبالمقارنة مع أنواع الجيارديا التي تصيب الثدييات، هناك دراسات قليلة حول الجيارديا الدواجن. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتوضيح العديد من جوانب عدوى الجيارديا المعوية في الطيور، بما في ذلك تصنيفها وعلم الأوبئة والأهمية السريرية
5. أشار اكتشاف أعداد كبيرة من الجيارديا المعوية في كل من البشر والدجاج إلى أن الدجاج يمكن أن يكون المصدر الرئيسي لعدوى الجيارديا المعوية الحيوانية المنشأ في البشر في محافظة بغداد، العراق.
6. يمكن تشخيص الأعراض المعدية المعوية لدى الأفراد المصابين بالطفيليات الأولية المدروسة مباشرة عن طريق الكشف الجزيئي وتحليل الشجرة التطورية مع نتائج مرضية. بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدامه كهدف للتدخل العلاجي لهذه الأوليات المعوية
7. بالإضافة إلى الدراسات البشرية، فإن التحليل الجزيئي التفصيلي للجيارديا الموجودة في الحيوانات الأليفة والماشية والحيوانات البرية والطيور والأسماك أمر ضروري للسماح بفهم أكثر اكتمالاً لطرق انتقال العدوى الحيوانية المنشأ. ستسمح البيانات الداعمة من هذه المصادر بفهم أكبر للمخاطر التي تهدد الصحة العامة لصياغة استراتيجيات محسنة لمراقبة المرض وتفشيه المحتمل
8. للسماح بمزيد من التطورات، يلزم تحسين وتوحيد أساليب الكشف لعزل الأكياس وتخصيبها باستخدام مجموعة من أنواع العينات، وخاصة تلك المأخوذة من البيئة ومياه الشرب ومصادر الغذاء.
