ناقشت رسالة الماجستير في كلية الطب البيطري بجامعة القادسية : دراسة فعالية لقاح الحمض النووي الرايبي منقوص الاوكسجين ضد فيروس الورم الحليمي البقري يعتمد على الجينات L1 و E6.
للطالب ( حسن هادي عبد الزهرة) وبإشراف ( أ.د. يحيى أسماعيل خضير وأ.م.د. حسام رحيم الحريشاوي)
تهدف الرسالة الى : شملت الدراسة الحالية على محورين اساسيين أولاً التحقق من الجزيئي للنوع السائد من فيروس الورم الحليمي البقري في العراق، وتوصيف التباين الجيني لجينات L1 و E6 من فيروس الورم الحليمي البقري، ثم استكشاف بنية البروتين والتنبؤ بالأنماط الجينية، وتقييم تأثير الطفرات على النمط الجيني لكلا الجينين. تضمن المحور الثاني تصميم استكشاف الفعالية الوقائية والمناعة بلازميدات لقاح الحمض النووي التي تعبر عن جينات L1 و E6 كاملة الطول بعد حقنها في نموذج فأر تجريبي.
بينت الرسالة : أن النوع السائد في اصابات الورم الحليمي في الابقار هو النوع 1 وانت نسبة الاصابات فية 42 (84%) من 50 عينة. بين كشف تحليل تسلسل 10 من عينات أن فيروس الورم الحليمي البشري من النوع 1 كان النوع السائد المتداول في مناطق الدراسة. أظهر التحليل النشوئي أن السلالات التي تم تحليلها كانت متقاربة بنسبة مسافة 1% – 15% من سلالات فيروس الورم الحليمي البشري. يشير هذا إلى أن الطفرة البسيطة قد تؤثر على مستضد L1. أظهر التنبؤ بالحواتم المناعية المتوقعة للخلايا البائية والتائية أن بروتين L1 لديه حواتم مناعية قوية ومحفوظة للغاية. وهي هدف واعد لتصميم لقاح الحمض النووي في الجهود المبذولة لاستنباط استجابة مناعية خلوية وخلطية مضادة لفيروس الورم الحليمي البقري. وبين نتائج المحور الثاني، ان الفعالية الوقائية والمناعة للبلازميدات المصممة للقاح DNA والتي تعبر عن جينات L1 و E6 بعد حقنها في نموذج فأر تجريبيا. تم تقسيم سبع مجموعات من الفئران بشكل عشوائي ثم تم تحصينها بجرعات متفاوتة من لقاحات DNA، تلاها تحدي BPV-1. تؤكد المستويات المتزايدة من IgM و IgG و IFN-γ و IL-2 مقارنة بمجموعات التحكم بعد لقاحات DNA أن كل من الجهاز المناعي الخلطي والخلوي حفز بشكل كبير. أظهر مزيج من لقاحات pcDNA3.1-L1 و pcDNA3.1-E6 أعلى مستويات الأجسام المضادة ومستويات السيتوكين مما يشير إلى التأثير التآزري بين لقاحين DNA. في تجربة التحدي الفيروسي، أظهرت الفئران الملقحة حماية قوية، مع انخفاض كبير في تكوين الورم الحليمي مقارنة بمجموعة التحكم. باختصار، تشير هذه النتائج إلى أن لقاحات الحمض النووي التي تحتوي على اثنين من البلازميدات توفر حماية فعالة ضد عدوى فيروس الورم الحليمي البشري من النوع الأول، وهو ما قد يوفر بدوره نهجًا جديدًا للسيطرة على عدوى فيروس الورم الحليمي البشري.إن الطفرات في الأحماض الأمينية لبروتينَي L1 وE6 في الفيروسات الحليمية يمكن أن تؤثر على هيكل القفيصة الفيروسية، والتعرف المناعي، والإمكانات المسببة للسرطان، وشدة المرض. لذا، يُعد مراقبة هذه الطفرات أمرًا بالغ الأهمية لفهم تطور الفيروس، وتطوير لقاحات فعالة، وتصميم علاجات موجهة ضد عدوى الفيروس الحليمي والأورام المرتبطة به.
استنتجت الرسالة : بينت الدراسة ان النوع 1 من فيروس الورم الحليمي البقري هو أكثر أنواع فيروسات الأبقار انتشارًا في العراق. وين التحيليل . ونتم الكشف لتسلسل القواعد االنتروجينية للجينات الكامل حيث تتمتع جينات L1 وE6 بحماية عالية، ولا تؤثر الطفرات في كلا الجينين على المناعة أو تتسبب في حدوث تباين مناعي. تحتوي بروتينات L1 وE6 على حواتم قوية للغاية يمكن أن تكون هدفًا واعدًا لتصميم لقاح الحمض النووي لإثارة استجابة مناعية خلوية وعضدية مضادة لـ BPV. . حيث قدم البحث الحالي رؤى مهمة حول تنوع نوع BPV-1 في المحافظات الوسطى في العراق. تتمتع لقاحات الحمض النووي بميزة واضحة في قدرتها على إثارة الاستجابات المناعية الخلطية والخلوية. يولد لقاح DNA الذي يستهدف فيروس الورم الحليمي البشري 1L1 وE6 استجابة مناعية خلوية وخلطية محددة لفيروس الورم الحليمي البشري 1 قادرة على منع نمو الأورام التي تعبر عن فيروس الورم الحليمي البشري 1 في الفئران.
اوصت الرسالة : . تعد لقاحات DNA استراتيجية مناعية واعدة للوقاية من فيروس الورم الحليمي البشري L1 وE6.
