رسالة ماجستير في كلية الطب البيطري بجامعة القادسية تناقش: الكشف المصلي والجزيئي لـ نيوسبورا الكلبيه في الكلاب الحقلية والمنزلية في محافظة بابل , العراق)

نوقشت في كلية الطب البيطري بجامعة القادسية رسالة الماجستير الموسومة (الكشف المصلي والجزيئي لـ نيوسبورا الكلبيه في الكلاب الحقليه والمنزلية في محافظة بابل, العراق)

للطالب علي حمزه مكطوف على قاعة الأستاذ الدكتور جواد العبيدي في مجال علوم الطب البيطري باختصاص الطفيليات البيطرية  , وقد اشرف على الرسالة أ.د. منصور جدعان علي التدريسي في كلية الطب البيطري , وقد هدفت الدراسة :

*تشخيص  طفيلي نيوسبورا الكلبيه مصليا و جزئيا.

* تحديد نسب الإصابة والنوع المسبب  لطفيلي نيوسبورا الكلبيه في الكلاب في محافظة بابل.

* دراسة تاثير بعض عوامل الخطورة كالجنس و العمر و المناخ على نسبة الإصابة.

أُجريت هذه الدراسة للكشف عن النيوسبورا الكلبية في الكلاب المنزلية والضالة باستخدام الاختبارات المصلية (الاليزاغير المباشره) بالإضافة إلى الطرق الجزيئية مثل تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي و الحقيقي(conventional and real-time PCR)؛ وكان هذا لتحديد تأثير الجنس والعمر والأشهر على معدل الإصابة في محافظة بابل.

تم جمع إجمالي 246 عينة (146 عينة دم و100 عينة براز) خلال الفترة من تموز إلى كانون الاول (2024). تم الكشف عن الأجسام المضادة لـ النيوسبورا الكلبية IgG في 26.7٪ (39/146) عن طريق الاليزا غير المباشر، حيث بلغ معدل الإصابة في الكلاب الضالة 36.8٪ (28/76)، أكثر من الكلاب المنزلية بنسبة 15.7٪ (11/70)، مع وجود فرق كبير للغاية (P ≤ 0.05). لا يوجد فرق كبير (P ≥ 0.05) بين الجنسين، الذكور 29.3٪ (22/75) مشابه تقريبًا للإناث 23.9٪ (17/71). تم التحقيق في ارتفاع نسبة الإصابة في الكلاب المنزلية في الفئة العمرية البالغة 17.5٪ (7/41)، بينما وجد معدل إصابة أقل بنسبة 13.7٪ (4/29) في الفئة العمرية للجراء دون وجود فرق كبير (P ≥ 0.05).وحسب الاشهرتم التحقيق في ارتفاع معدل الإصابة في الكلاب الضالة والكلاب المنزلية في ايلول (34.6٪) ، بينما وجد معدل إصابة أقل في كانون الاول (13٪) دون وجود فرق كبير ((P ≥0.05.   تم استخراج الحمض النووي من 100 عينة دم كلب (39 إيجابية و 61 سلبية من الاليزا غير المباشر)، حيث تم استخدام منطقة جزئية محددة داخل جين البروتين المحتوي على مجال M48 لعائلة الببتيداز المفترضة لتحديد النيوسبورا الكلبية. أظهرت النتائج أن معدل الإصابة كان 9٪ (9/100)، باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي. كان معدل الإصابة مرتفعًا في الكلاب الضالة بنسبة 11.1٪ (6/54) مقارنة بالكلاب المنزلية، والتي سجلت معدل إصابة بنسبة 6.5٪ (3/46)، مع عدم وجود فرق كبير عند P≥ 0.05. بلغ معدل الإصابة عند الذكور 9.6% (5/52)، وهو أعلى من معدل الإصابة عند الإناث 8.3% (4/48)، مع عدم وجود فرق كبير عند P≥0.05. وسُجل أعلى معدل إصابة في الفئة العمريةالبالغة لدى الكلاب المنزلية،  7.6% (2/26)، بينما وُجد معدل إصابة أقل بنسبة 5% (1/20) في الفئة العمرية للجراء دون وجود فرق كبير (P≥0.05). وحسب الاشهرتم التحقيق في معدل إصابة أعلى لدى الكلاب الضالة والكلاب المنزلية في ايلول (17.6%) ، بينما وُجد معدل إصابة أقل في كانون الاول (4.5%). ولا يوجد فرق كبير بين الأشهر عند P≥0.05. وفي حين كانت النتيجة في تفاعل البلمرة المتسلسل الحقيقي (TaqMan qPCR)، كانت النتيجة مماثلة لتفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي لنفس عينات الدم بنسبة 9% (9/100)، ولكن باستخدام منطقة جزئية محددة من جين NC5.

وأظهرت نتائج اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي لعينات البرازنسبة الاصابة بلغ 11% (11/100). كما وجد نسبة الاصابة أعلى في الكلاب الضالة 13.5% (8/59) مقارنة بالكلاب المنزلية 7.31% (3/41)، دون وجود فرق معنوي عند قيمة P≥0.05. كما أظهرت نتائج هذه الدراسة عدم وجود فرق معنوي عند P≥0.05 في نسبة الإصابة بين الذكور والإناث، حيث كان معدل الإصابة أعلى في الذكور 11.5% (6/52) مقارنة في الإناث 10.4% (5/48). كما أظهرت النتيجة عدم وجود فرق معنوي عند P≥0.05 في معدل انتشار العدوى بين الفئات العمرية المختلفة، حيث بلغ أعلى معدل إصابة 6.8% (2/29) في الفئة العمرية للبالغين، بينما كان أقل معدل إصابة في الفئة العمرية للجراء عند 5% (1/20). وفقًا للأشهر، سجل  معدل إصابة أعلى في ايلول (18.7٪) ، بينما سجل  معدل إصابة أقل في كانون الاول (5.8٪)دون وجود فرق معنوي عند P≥0.05. في حين ان النتيجة التي تم الحصول عليها في تفاعل البلمرة المتسلسل الحقيقي (TaqMan qPCR)، كانت مماثلة لتفاعل البوليميراز المتسلسل التقليدي لنفس عينات البراز بنسبة 11% (11/100)، ولكن باستخدام منطقة جزئية محددة من جين NC5.

أخيرًا، تم إجراء التحليل التطوري لعشرة عزلات عراقية جديدة (خمس عزلات دم وخمس عزلات براز) من النيوسبورا الكلبية. تم تسجيل هذه العزلات في NCBI GenBank تحت أرقام الوصول PQ817119 و PQ817120 و PQ817121 و PQ817122 و PQ817123 و PQ817124 و PQ817125 و PQ817126 و PQ817127 و PQ817128. وتراوحت نسبة توافق العزلات العراقية الجديدة مع بعض العزلات العالمية بين 97.01-100٪.