نوقشت في كلية الطب البيطري بجامعة القادسية رسالة الماجستير الموسومة (مقارنة تعدد الاشكال الجيني لجين Cytochrome b لطفيلي Theileria annulata في الابقار والجاموس)
للطالب مجتبى مؤيد عبد الكل وبأشرف أ.د. منصور جدعان علي .
وقد هدفت الدراسة:
* الكشف عن إصابة T. annulata في الأبقار والجاموس باستخدام الفحص المجهري.
* تحليل التعدد الشكلي الجيني (Genetic Polymorphism) لجين cytochrome b الخاص بـ T. annulata المعزولة من الأبقار والجاموس باستخدام تقنيات PCR وتسلسل الحمض النووي (DNA Sequencing) ، ومقارنة أوجه التشابه والاختلاف بين العزلات التي تم الحصول عليها.
* تقييم التباين الجيني بين عزلات T. annulata التي تم الحصول عليها، ودراسة الفروقات بين الأنواع المضيفة (الأبقار والجواميس) إذا أمكن.
* إجراء التحليل التطوري الوراثي (Phylogenetic Analysis) للعزلات المحلية من T. annulata ومقارنتها بالعزلات العالمية المسجلة في قواعد البيانات الجينية.
* دراسة تاثير بعض عوامل الخطورة كالجنس و العمر و المناخ على نسبة الإصابة.
أُجريت هذه الدراسة للكشف عن T. annulata في الابقار و الجاموس باستخدام المجهر بالإضافة إلى الطرق الجزيئية مثل تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي (conventional PCR)؛ وكان هذا لتحديد تأثير الجنس والعمر والأشهر على معدل الإصابة .
أظهر الفحص المجهري معدل إصابة كلي بلغ 32.00% (48/150). وسُجل معدل إصابة أعلى في الأبقار بنسبة 41.33% (31/75) مقارنة بالجاموس 22.67% (17/75)، مع وجود فروق معنوية عند 0.05 >p. فيما يتعلق بالفئات العمرية، لوحظ أعلى معدل إصابة في الحيوانات الصغيرة اقل من (1سنة) في كل الأبقار 52.94% (18/34) والجاموس 29.55% (13/44)، في حين كان أدنى معدل في الأبقار ضمن عمر (1-2 سنة) بنسبة 26.09% (6/23)، وفي الجاموس ضمن عمر (2-3 سنوات) بنسبة 12.50% (1/8)، مع عدم وجود فروق معنوية عند p>0.05. كما اختلفت نسبة الإصابة باختلاف الأشهر المدروسة، حيث سُجل أعلى معدل في الابقار خلال شهر تشرين الثاني 56.00% (14/25، بينما كان الادنى في شهر شباط 18.18% (2/11). وفي الجاموس، سُجل اعلى معدل في كانون الاول 33.33% (8/24)، وأدنى معدل في شباط 0.00% (0/11)، دون فروق معنوية عند p>0.05.
أما الكشف الجزيئي باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي (PCR) مستهدفًا جين cytochrome b، فقد أظهر معدل إصابة بلغ 26% (39/150). وكان معدل الإصابة أعلى في الابقار 30% (23/75) مقارنة بالجاموس 21.33% (16/75). وبالنسبة للجنس، سُجل أعلى معدل في إناث الأبقار 36.73% (18/49) مقارنة بالذكور 19.23% (5/26)، بينما في الجاموس كان أدنى معدل في الإناث 20.90% (14/67) مقارنة بالذكور 25.00% (2/8). وبحسب العمر، سُجل أعلى معدل إصابة في الحيوانات الصغيرة في كل من الأبقار 41.18% (14/34) والجاموس 27.27% (12/44)، في حين كان أدنى معدل في الفئة العمرية (2-3 سنوات) في كل من الأبقار 16.67% (3/18) والجاموس 12.50% (1/8)، دون فروق معنوية عند P>0.05. اما من حيث الاشهر فقد سجل اعلى معدل اصابه في شهر تشرين الثاني في كل من الابقار40.00% (10/25) والجاموس 38.10% (8/21)، بينما كان أدنى معدل في شهر شباط في كلا النوعين حيث بلغ في الابقار 18.18% (2/11) وفي الجاموس 0.00% (0/11)، دون فروق معنوية عند p>0.05.
أظهرت نتائج التسلسل والتحليل الوراثي أن 20 عزلة محلية من T. annulata (10من الأبقار و10من الجاموس) تم تسجيلها في قاعدة بيانات NCBl GenBank تحت أرقام الإدخال PX961346,PX961347,PX961348,PX961349,PX961350,PX961351,PX961352,PX961353,PX961354,PX961355) في الابقار، و (PX961336,PX961337, PX961338,PX961339, PX961340 ,PX961341PX961342,PX961343, PX961344, PX961345) في الجاموس.
وأظهرت هذه العزلات تشابهاً وراثياً عاليًا مع العزلات العالمية من دول مثل (الهند، تركيا، باكستان، الصين، السودان، مصر) في كل من الابقار والجاموس، حيث تراوحت نسبة التشابه بين (98.66 – 100%) في الأبقار و(97.58-100%) في الجاموس. كما أظهر التحليل الوراثي التقاربي أن العزلات المحلية تجمعت بشكل وثيق مع السلالات العالمية، مما يدل على وجود تباين وراثي محدود. تؤكد هذه الدراسة وجود T. annulata في الابقار والجاموس في منطقه الدراسة، وتسلط الضوء على أهمية الجمع بين الطرق المجهرية والجزيئية للحصول على تشخيص دقيق ودعم الدراسات الوبائية.
