نوقشت في كلية الطب البيطري بجامعة القادسية رسالة الماجستير الموسومة (التعبير الجيني للجينات المرتبطة بالمناعة في الحالات الحادة والمزمنة للإصابة بـ Theileria lestoquardi في الماعز مع تحليل العلاقة الوراثية التطورية) للطالبة شروق سامي تركي وبإشراف أ.د. منصور جدعان علي .:
*هدفت الدراسة إلى الكشف عن أنواع الثيليريا في الماعز بواسطة الفحص المجهري لمسحات الدم المصبوغة بصبغة كيمزا، وتأكيد وجود Theileria lestoquardi باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، ودراسة تأثير العمر والجنس وشهر جمع العينات في معدل انتشار الإصابة، والتوصيف الجزيئي للطفيلي من خلال تحديد التسلسل النووي وتحليل العلاقات الوراثية، فضلاً عن تقييم الاستجابة المناعية للعائل من خلال دراسة أنماط التعبير الجيني لكل من TNF-α و IFN-γ في الحالات الحادة والمزمنة من داء الثيليريا في الماعز.
جمعت (102) عينة دم من الماعز خلال المدة الممتدة من آب إلى كانون الأول 2025. أظهر الفحص المجهري لمسحات الدم المصبوغة بصبغة كيمزا نسبة انتشار كلية بلغت 50% (51/102). وكانت نسبة الإصابة أعلى في الإناث (55.35%) مقارنة بالذكور (43.47%)، إلا أنه لم تُسجل علاقة معنوية بين الإصابة والجنس (P>0.05). كما لم يُظهر الفحص المجهري وجود علاقة معنوية بين العمر ومعدل الإصابة (P>0.05). في المقابل، سُجلت فروقات معنوية في نسب انتشار الإصابة بين أشهر جمع العينات (P<0.05)، إذ كانت أعلى نسبة إصابة في شهر آب (71.42%) وأدناها في شهر كانون الأول (25%.).
أظهر الكشف الجزيئي باستخدام تقنية PCR التقليدية، باستهداف جين البروتين السطحي للميروزويت (MSP)، نسبة انتشار كلية لإصابة T lestoquardi. بلغت 35.29% (36/102) بين الماعز المفحوصة. وسُجلت نسبة إصابة أعلى قليلًا في الإناث مقارنة بالذكور، إلا أن الفروق لم تكن معنوية إحصائيًا (P>0.05). وعلى العكس من ذلك، أظهر تحليل PCR وجود علاقة معنوية بين معدل الإصابة وكل من الفئة العمرية وشهر جمع العينات (P<0.05). وكانت أعلى نسبة انتشار جزيئي في شهر آب (59.09%)، بينما سُجلت أدنى نسبة في شهر كانون الأول (10%).
اختيرت عشر عينات موجبة لتفاعل PCR ذات تضخيم نووي عالي الجودة لإجراء تحليل التسلسل الجيني، وأُودعت لاحقًا في قاعدة بيانات GenBank تحت أرقام الإيداع PX853128–PX853137. وأكد تحليل التسلسل الجيني هوية جميع العزلات بأنها T. lestoquardi إذ تراوحت نسب التشابه في تتابع النيوكليوتيدات بين 97.68% و99.54% مع عزلات مرجعية من مصر وإيران وباكستان والهند. كما أظهر تحليل العلاقات الوراثية أن العزلات العراقية تجمعت ضمن فرع T. lestoquardi وأبدت تقاربًا وراثيًا كبيرًا مع العزلات الإقليمية، مما يشير إلى محدودية التباعد الوراثي ووجود أصل تطوري مشترك.
وقبل إجراء تحليل التعبير الجيني، جرى التحقق من ملاءمة جين GAPDH بوصفه جينًا مرجعيًا داخليًا للتطبيع. وتم تقييم مستويات التعبير النسبي لجيني TNF-α و IFN-γ باستخدام تقنية RT-qPCR. أظهرت النتائج ارتفاعًا معنويًا في مستوى التعبير الجيني لـ TNF-α في الحالات الحادة (1.098 ± 0.069) مقارنة بالحالات المزمنة (0.704 ± 0.052) (P<0.01). وبالمثل، كان التعبير الجيني لـ IFN-γ أعلى معنويًا في الإصابات الحادة (1.772 ± 0.261) مقارنة بالإصابات المزمنة (1.097 ± 0.147) (P<0.05). إضافة إلى ذلك، أظهر IFN-γ زيادة أكبر في مقدار التغير التعبيري (Fold Change) مقارنة بـ TNF-α، مما يدل على استجابة مناعية خلوية من نمط Th1 أكثر وضوحًا خلال مراحل الإصابة الحادة. Th1 أكثر وضوحًا خلال مراحل الإصابة الحادة .
