نوقشت في كلية الطب البيطري بجامعة القادسية رسالة الماجستير الموسومة (التعبير الجيني للجينات المرتبطة بالمناعة في الحالات الحادة والمزمنة للإصابة بـ Theileria lestoquardi في الاغنام مع تحليل العلاقة الوراثية التطورية) للطالبة اسراء جميل طالب وبأشرف أ.د. منصور جدعان علي .
هدفت الدراسة الحالية إلى الكشف عن أنواع الثيليريا في الاغنام بواسطة الفحص المجهري لمسحات الدم المصبوغة بصبغة كيمزا، وتأكيد وجود Theileria lestoquardi باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، ودراسة تأثير العمر والجنس وشهر جمع العينات في معدل انتشار الإصابة، والتوصيف الجزيئي للطفيلي من خلال تحديد التسلسل النووي وتحليل العلاقات الوراثية، فضلاً عن تقييم الاستجابة المناعية للعائل من خلال دراسة أنماط التعبير الجيني لكل من TNF-α و IFN-γ في الحالات الحادة والمزمنة من داء الثيليريا في الاغنام .
جُمعت 98 عينة دم من الأغنام خلال الفترة الممتدة من آب إلى كانون الأول 2025 في الديوانية .أظهر الفحص المجهري معدل إصابة كلي بأنواع Theileria spp. بلغ 61.22% (60/98). وسُجلت أعلى نسبة انتشار في شهر آب (92%)، تلاه أيلول (73.91%)، في حين سُجلت أدنى نسبة في كانون الأول (30%)، مع وجود فروق عالية المعنوية بين أشهر الدراسة (P < 0.0001).وفيما يتعلق بالجنس، أظهرت الإناث معدل إصابة أعلى بلغ 65.11% مقارنة بالذكور 58.18%، إلا أن الفرق لم يكن ذا دلالة إحصائية (P = 0.484).أما وفقًا للعمر، فقد سُجل أعلى معدل إصابة (90%) في الأغنام التي يزيد عمرها على 9 أشهر، تلتها الأغنام بعمر 3 سنوات (55%)، ثم الأغنام بعمر 4 سنوات (50%)، في حين سُجل أدنى معدل إصابة (42.85%) في الفئة العمرية 1–2 سنة. وأظهر التحليل الإحصائي وجود ارتباط عالي المعنوية بين العمر ومعدل الإصابة .
تم استخلاص الحمض النووي DNA من عينات الدم، وأُجري تفاعل البلمرة المتسلسل PCR لاستهداف جين بروتين سطح الميروزويت الخاص بـ T. lestoquardi. وتم تحليل نواتج الـPCR الموجبة، التي بلغ حجمها 785 زوجًا قاعديًا (bp)، باستخدام الرحلان الكهربائي الهلامي. كما تم اختيار عشر عينات موجبة لإجراء التسلسل الجيني والتحليل التطوري. بعد ذلك، تم استخلاص الحمض النووي الريبي RNA وإجراء النسخ العكسي له وقياسه باستخدام RT-qPCRاختيرت عشر عينات موجبة لتفاعل PCR ذات تضخيم نووي عالي الجودة لإجراء تحليل التسلسل الجيني، وأُودعت لاحقًا في قاعدة بيانات GenBank تحت أرقام الإيداع PX853128–PX853137. وأكد تحليل التسلسل الجيني هوية جميع العزلات بأنها T. lestoquardi إذ تراوحت نسب التشابه في تتابع النيوكليوتيدات بين 97.68% و99.54% مع عزلات مرجعية من مصر وإيران وباكستان والهند. كما أظهر تحليل العلاقات الوراثية أن العزلات العراقية تجمعت ضمن فرع T. lestoquardi وأبدت تقاربًا وراثيًا كبيرًا مع العزلات الإقليمية، مما يشير إلى محدودية التباعد الوراثي ووجود أصل تطوري مشترك.
وأظهرت دراسات التعبير الجيني نجاح تضخيم جينات GAPDH وTNF-α وIFN-γ. كما ارتفع تعبير TNF-α بشكل معنوي في حالات الثيليريوز الحادة. إذ بلغ متوسط التغير المضاعف في التعبير الجيني في الحالات الحادة 1.960 ± 0.2445، مقارنةً بمتوسط بلغ 1.183 ± 0.1369 في الحالات المزمنة، وكان هذا الفرق ذا دلالة إحصائية (P < 0.05). وتراوح مستوى تعبير TNF-α في الحالات الحادة بين 1.357–3.117، بينما تراوح في الحالات المزمنة بين 0.7120–1.986.
وتشير هذه النتائج إلى أن حالات الثايليا الحادة أظهرت درجة أعلى من الالتهاب، مصحوبة بزيادة في الاستجابة المناعية من نمط Th1، مقارنةً بالحالات المزمنة.
